ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப்: செய்முறை கொள்கைகளை

ஒளி மேலும் கனிம மற்றும் கரிம திரவங்கள் உறிஞ்சுதல் மற்றும் மறு-வெளியீடு வெப்பம் இன்றி அல்லது ஃப்ளோரசன்ஸின் விளைவாகும். நிகழ்வுகளுக்கும் இடையிலுள்ள வேறுபாடு ஒளி பெருக்கு உறிஞ்சுதல் மாசு கட்டுப்பாட்டு இடையே இடைவெளியின் கால அளவு. இந்த நடவடிக்கைகளின் ஃப்ளோரசன்ஸின் வெப்பம் இன்றி போது, கிட்டத்தட்ட ஒரே நேரத்தில் ஏற்படும் போது - சில தாமதம்.

வரலாற்று தகவல்களை

1852 இல் பிரிட்டிஷ் விஞ்ஞானி ஸ்டோக்ஸ், முதல் ஃப்ளோரசன்ஸின் விவரித்தார். அவர் பரிசோதனைகள் விளைவாக ஒரு புதிய கால அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது fluorspar, புற ஊதா ஒளி கீழ் சிவப்பு விளக்கு வெளியிடுவதில்லை இது. ஸ்டோக்ஸ் ஒரு சுவாரஸ்யமான நிகழ்வு குறிப்பிட்டார். அது ஒளிரும் கதிரியக்கத்தின் அலைநீள எப்போதும் ஆவதாகக் ஒளியின் ஓட்டம் விட அதிகம் என்று காணப்படுகிறது.

19 ஆம் நூற்றாண்டின் கருதுகோளில் உறுதிப்படுத்த பல பரிசோதனைகள் நடந்து வருகின்றன. அவை மாதிரிகளின் பல்வேறு புறஊதாக் கதிர்கள் செல்வாக்கின் கீழ் உட்கிரகிப்பதற்குக் என்று காட்டியது. பொருட்கள் மத்தியில், மற்ற விஷயங்களை, இருந்திருக்கும் படிகங்கள், பிசின்கள், கனிமங்கள், குளோரோபில், கச்சா மருந்துகள், கனிம கலவைகள், வைட்டமின்கள், எண்ணெய்கள் மத்தியில். உயிரியல் சோதனைகள் சாயங்கள் நேரடி பயன்பாட்டினை 1930 இல் மட்டும் தொடங்கியது,

ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப்: விளக்கம்

20 ஆம் நூற்றாண்டின் ஆராய்ச்சியின் முதல் பாதியில் பயன்படுத்தப்படும் பொருள்கள் சில உயர் துல்லியம் காட்சிக்கு. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. முறைகள் மாறுபட்ட மூலம் அடைய முடியாதென்றும் செயல்திறன், நன்றி, ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப் முறை உயிரியல்மருத்துவ மற்றும் உயிரியல் ஆராய்ச்சி முக்கியமான கருவியாகப் மாறிவிட்டது. சமமாக முக்கியமான முடிவுகளை பெற்று, அவரை பொருட்கள் பயன்படுத்தப்பட்டன.

? என்ன நன்மைகள் ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப் முறை செய்கிறது? புதிய பொருட்கள் பயன்படுத்தி சாத்தியமாகியிருப்பதை மற்றும் மிகவும் குறிப்பிட்ட செல் submicroscopic உறுப்புகளின் தேர்வு செய்துள்ளது. ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப் ஒற்றை மூலக்கூறுகளை கண்டறிய முடியும். சாயங்கள் பல்வேறு ஒரே நேரத்தில் பல பொருட்களை அடையாளம் கண்டுபிடிப்பதற்கும் உதவும். உபகரணங்கள், இது அடுத்தடுத்து மாதிரியின் குறிப்பிட்ட பண்புகளை சார்ந்ததாக இருக்கிறது விளிம்பு வரம்பு மட்டுப்படுத்தப்பட்ட வெளி சார்ந்த தீர்மானம் போதிலும், இந்த மட்டத்திற்கு கீழ் மூலக்கூறுகளின் அடையாள மேலும் சாத்தியமானதே. கதிர்வீச்சு கண்காட்சியின் autofluorescence பிறகு பல்வேறு மாதிரிகள். இந்த நிகழ்வு பரவலாக பாறைகள் பற்றிய அறிவியல் ஆய்வு, தாவரவியல், குறைக்கடத்தி தொழிற்துறையில் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

அம்சங்கள்

விலங்கு இழையங்கள் அல்லது நோய்க்கிருமிகள் அடிக்கடி சிக்கலான அல்லது மிகவும் பலவீனமாக அல்லது மிக வலுவான குறிப்பிட்டுக் காட்ட autofluorescence ஆய்வு. எனினும், ஆய்வுகள் மதிப்பு ஒரு குறிப்பிட்ட அலைநீளத்தில் கிளர்ச்சியுறும்போது பொருள் கூறுகள் அறிமுகத்திற்கு மற்றும் தேவையான ஒளி ஓட்டம் தீவிரம் உமிழும் பெற்றுக் கொள்கிறார். Fluorochromes சுதந்திரமாக திறன் சாயங்கள் கட்டமைப்புகள் (புலப்படும் அல்லது கண்ணுக்கு தெரியாத) இணைக்கப்பட்ட செயல்படும். இவ்வாறு அவர்கள் இலக்கு ஒரு உயர் தேர்ந்தெடுத்தல் மற்றும் குவாண்டம் மகசூல் வேண்டும்.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப் பரவலாக இயற்கை மற்றும் செயற்கை சாயங்கள் வருகையுடன் என்பதால் பயன்படுத்தப்பட்டு வருகிறது. அவர்கள் மாசு மற்றும் ஆவதாகக் சில தீவிரம் சுயவிவரங்கள் கொண்டிருந்தன மற்றும் குறிப்பிட்ட உயிரியல் இலக்குகளுக்கு ஏற்ப இலக்கு.

தனிப்பட்ட மூலக்கூறுகள் அடையாள

பெரும்பாலும், சிறந்த நிலைமைகளில், நீங்கள் ஒரு தனி உறுப்பு ஒளி பதிவு செய்யலாம். இதற்காக, மற்ற விஷயங்களை, அது தேவையான கண்டுபிடிப்பு மற்றும் ஒளியியல் பின்னணி போதுமான குறைந்த இரைச்சல் வழங்க உள்ளது. காரணமாக photobleaching வெளியிடுவதில்லை முடியும் வரை 300 ஆயிரம். ஃபோட்டான்களால் தோல்வி Fluorescein மூலக்கூறு. செயல்முறை 20% சேகரிப்பு செயல்திறனில் மற்றும் சுமார் 60 ஆயிரம் தொகை அவற்றை பதிவு செய்யலாம்.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. பனிச்சரிவு ஃபோடோடிகோடுகளின் அல்லது மின்னணு பெருக்கல் அடிப்படையில் ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப், ஆராய்ச்சியாளர்கள் இரண்டாவது மூலமாக தனிநபர் மூலக்கூறுகளின் நடத்தை கண்காணிக்க அனுமதித்தது, சில சந்தர்ப்பங்களில் கூட நிமிடங்கள்.

சிக்கலான

ஆப்டிகல் சத்தம் பின்னணி நசுக்கப் பட்டதாக ஆதரவாக ஒரு முக்கிய பிரச்சினை. காரணமாக வடிகட்டிகள் மற்றும் லென்ஸ்கள் சில autofluorescence வெளிப்படுத்துகின்றன வடிவமைப்பிலும் பயன்படுத்தப்படுகிறது பொருள்களில் பெரும்பாலானவற்றின், ஆரம்ப கட்டங்களில் விஞ்ஞானிகள் முயற்சிகள் குறைந்த ஃப்ளோரசன்ஸின் கொண்ட கூறுகளின் உற்பத்திக்கு சார்ந்த இதற்கு முக்கியக் காரணமானது. எனினும், அடுத்தடுத்த சோதனைகள் புதிய முடிவுகளை வழிவகுத்தது. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. குறிப்பாக, ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப், மொத்த உள் பிரதிபலிப்பு அடிப்படையிலான, அது ஒரு குறைந்த பின்னணி மற்றும் அதிக தீவிரம் ஆவதாகக் ஒளி அடைய அனுமதிக்கிறது என்று கண்டறியப்பட்டுள்ளது.

பொறிமுறையை

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. மொத்த உள் பிரதிபலிப்பு அடிப்படையிலான ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப் கொள்கைகளை, நிலையற்ற அலை அல்லது நிலையற்ற பயன்படுத்துவது ஆகும். அது வெவ்வேறு கொண்ட ஊடக இடையே எல்லை ஏற்படுகிறது ஒளிவிலகன். இந்த வழக்கில், ஒளிக்கற்றையை முப்பட்டகத்தின் வழியாகச் செல்லும். அது ஒரு உயர் ஒளிவிலகல் அளவுரு உள்ளது.

குறைந்த அளவுருவுள்ள நீர்சார்ந்த அல்லது கண்ணாடி அருகில் முப்பட்டகத்தின். மேலும் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது என்றும் ஒரு கோணத்தில் அதை இயக்கிய ஒளிக்கற்றையைப் என்றால், பீம் முற்றிலும் இடைமுகம் இருந்து பிரதிபலிக்கிறது. இந்த நிகழ்வு, இதையொட்டி, nonpropagating அலைகள் ஏற்படுத்துகிறது. வேறு வார்த்தைகளில் கூறுவதானால், உருவாக்கப்படும் மின்காந்த தூரத்தில் 200 நேனோமீட்டருக்கும் குறைவான கீழ் நிலையிலுள்ள ஒளிவிலகல் அளவுருவுள்ள ஒரு ஊடகமாக ஊடுருவுகிறது.

நிலையற்ற அலை ஒளியின் தீவிரம் fluorophores தூண்ட போதுமானதாக இருக்கும். எனினும், ஏனெனில் அதன் உச்சமான சிறிய ஆழம், அதன் தொகுதி மிகவும் குறைவாக இருக்கும். விளைவாக ஒரு குறைந்த அளவு பின்னணி உள்ளது.

மாற்றம்

ஒளி நுணுக்குக்காட்டியைப் மொத்த உட்புற பிரதிபலிப்பு அடிப்படையாக கொண்டது, எபி-வெளிச்சமும் அமைப்பை ஏற்படுத்த இயலும். இந்த உயர் துளையை கொண்ட விழி வில்லைகள் தேவைப்படுகிறது (குறைந்தபட்சம் 1.4, ஆனால் அது 1.45-1.6 அடைந்தது விரும்பத்தக்கதாகும்) ஓரளவு மனம் துறையில் அமைப்பின் வெளிச்சம். பிந்தைய ஒரு சிறிய ஸ்பாட் அளவு சாதிக்க முடியும். அதிக சீரான ஸ்ட்ரீம் ஒரு பகுதியை தடுக்கப்பட்டது ஒரு மெல்லிய வளையம் பயன்படுத்தி. மொத்தம் பிரதிபலிப்பு உள்ளது பின்னர் விமர்சன கோணம்,, நாம் லென்ஸ் கரைத்துக் குடித்த நடுத்தர மற்றும் நுண்ணோக்கி கவர் கண்ணாடி விலகல் ஏற்படுவதன் காரணமாக ஒரு உயர் மட்ட வேண்டும்.